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  • 产品名称:3:1Agarose 3:1琼脂糖

  • 产品型号:
  • 产品厂商:FuShen
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简单介绍:
3:1Agarose 3:1琼脂糖 3:1Agarose 3:1琼脂糖
详情介绍:
FS0364-5G 3:1Agarose 3:1琼脂糖 5g 180
FS0364-25G 3:1Agarose 3:1琼脂糖 25g 720
FS0364-100G 3:1Agarose 3:1琼脂糖 100g 2520

描述:

琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如NorthernSouthern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。

本品为NuSieve3:1 琼脂糖,与常规琼脂糖相比,对PCR产物,小片段DNA1000bp以下)具有很高的分辨率。此外,还具有如下特点:1)易溶解,胶液更清澈,可以配制高达5%的凝胶;2)很低的背景;3)品质稳定等。

琼脂糖的基本参数,包括:

1)   硫酸盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团;

2)   凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力;

3)   胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点。

4)   电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

产品性质

外观(Appearance

白色粉末

凝胶强度(Gel Strength

650g/cm21.5% gel

凝胶温度(Gel Point

36℃(1.5% gel

融胶温度(Melting Point

80℃(1.5% gel

电渗值(EEO, -mr

0.10

外观(Appearance

无色清澈胶液

硫酸盐(Sulfate, %

0.10%

水分(Moisture

10%

灰分(Ash Content

0.5%

DNA酶(DNase

Not detected

RNA酶(RNase

Not detected

蛋白酶(Protease

Not detected

核酸内切酶(Endonuclease

Not detected

使用方法

1)     配制适量电泳及制胶用的缓冲液(根据电泳需要,配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液),倒入合适三角瓶中。【注意】:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。

2)根据制胶量及凝胶浓度,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量)。

3)在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置中火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30s,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热1分钟(或加热直至琼脂糖完全溶解)。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。

【注意】:必须保证琼脂糖充分完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。

4)使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5µg/ml,并充分混匀。

【注意】:溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时,请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品(YeaRed 核酸染料,Cat# 10202),使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。

5)将琼脂糖溶液倒入制胶模具中,在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5mm之间。

6)在室温下使胶凝固(大约30min-1h),然后放置于电泳槽中进行电泳。

【注意】:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存 2天。

琼脂糖浓度与DNA分离范围

线性DNA片段大小(bp

10-100bp

100-500bp

500-1000bp

琼脂糖浓度(%),1×TAE Buffer

6.0

4.0

3.0

琼脂糖浓度(%),1×TBE Buffer

5.0

3.0

2.0









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